Студопедия

КАТЕГОРИИ:

АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника



Экстракция (извлечение) белков

Читайте также:
  1. Белково-калорическая недостаточность. Кваши-оркор. Профилактика.
  2. Белковый обмен
  3. Биологические функции белков
  4. Биологические функции белков
  5. Биологические функции белков
  6. Вители сложных белков. Какая реакция необходима для
  7. ВЛИЯНИЕ ИЗМЕНЕНИЯ БЕЛКОВ НА КАЧЕСТВО КУЛИНАРНОЙ ПРОДУКЦИИ
  8. ГИДРАТАЦИЯ И ДЕГИДРАТАЦИЯ БЕЛКОВ
  9. Глава IV. Белково-энергетическая недостаточность
  10. ДЕНАТУРАЦИЯ БЕЛКОВ

Измельчение биоматериала, как правило, проводят одновременно с экстракцией. Преимущественно для извлечения белков используют 8–10% растворы нейтральных солей. Большая часть белков хорошо растворяется в таких солевых растворах.

Поскольку на растворение белков сильное влияние оказывает рН среды, большинство солей применяют в виде буферных смесей (фосфатных, ацетатных, боратных, цитратных и т.п.). Широко используют буферные смеси, составленные с применением органических соединений:

– трис-(оксиметил)-аминометан – (НОСН2)3CNH2 и его соль с соляной кислотой (трис-буфер);

– диэтилбарбитуровая кислота и ее натриевая соль (веронал-мединаловый буфер)

– N,N-бис(2-оксиэтил)-глицин – (НО-СН2-СН2)2NСН2СООН (бициновый буфер)

Применяемый при экстракции глицерин предохраняет белки от денатурации.

Извлечению белков из биологического материала и белково-липидных комплексов биомембран способствует обработка их детергентами – додецил сульфат натрия, тритон-Х-100 и дезоксихолат натрия (рис. 11).

 
 

Рис. 11. Детергенты, используемые для экстракции белков

 

Детергенты ослабляют гидрофобные белок-липидные и белок-белковые взаимодействия. В результате происходит деструкция биологических мембран и высвобождение из них структурных и функциональных белковых компонентов, например, ферментов.

Перечисленные выше методы выделения и экстракции белков применяются в основном при исследовании животных тканей.

Выделение белков из растительного сырья осуществить труднее. Это связано со строением растительной клетки. Клеточная стенка у растений многослойная и очень прочная, разрушить ее сложно, поэтому при гомогенизации высока вероятность денатурации белка.

В связи с этим, при выделении белков из вегетативных органов растений используют специфические приемы – обработку тканей водно-эфирной смесью, резко повышающей проницаемость оболочки растительной клетки (метод Чибнелла), экстракцию белков смесью фенола, уксусной кислоты и воды (метод Синджа) и др.


Дата добавления: 2015-02-09; просмотров: 52; Нарушение авторских прав


<== предыдущая лекция | следующая лекция ==>
Электрофорез | Методы фракционирования (разделения) белков
lektsii.com - Лекции.Ком - 2014-2018 год. (0.007 сек.) Главная страница Случайная страница Контакты