Старатегия клонирования в клетках растений

Легче культивировать в жид среде. Растения перестают быть автотрофами, им необходимы фитогормоны, кислород.

Получают гормоны, лекарства, красители, инсектециды. Вкусовые добавки

Этапы культивирования:

· Взять растение

· Получить отдельные клетки, подействовав на них ферментами пектиназой, целлюлазой

· Лишить клетки клет. Стенки и получение протопластов . Их можно культивировать

· Регенерация протопластов

· Деление протопластов

· Образование каллусов

· Воздействие фитогормонов и образование побегов из каллуса и получение нормального растения

Для клонирования растительную клетку достаточно изолировать из целого растения и поместить на питательную среду, содержащую солевые компоненты, витамины, гормоны и источник углеводов, она начинает делиться и образует культуру каллуса. В дальнейшем каллусы можно размножить и получить неограниченное количество биомассы. Основная трудность, с которой сразу же приходится сталкиваться исследователю - это то, что клетки в искусственных условиях начинают бурно делиться и расти, но при этом часто не в состоянии продуцировать вторичные метаболиты, т.е. биологически активные вещества растений. Клеточная инженерия позволяет получать гибридные штаммы, клетки или даже целые растения (растения-регенераты), скрещивая между собой филогенетически (т.е. эволюционно) отдаленные организмы. В случае неполного слияния клеток (т.е. клетка-реципиент получает отдельные участки ядерного генетического материала или части клетки-донора (органеллы)) получаются асимметричные гибриды. Делается это для того, чтобы растение реципиент получило новые удобные для человека свойства, повышенную устойчивость к вирусам, к гербицидам, к вредителям и болезням растений. Пищевые продукты, полученные из таких генно-измененных культур, могут иметь улучшенные вкусовые качества, лучше выглядеть и дольше храниться. Также часто такие растения дают более богатый и стабильный урожай, чем их природные аналоги. За последнее время созданы ряд межвидовых и межродовых гибридов табака, картофеля, томата, капусты, турнепса, сои и мн. др. Использование достижений клеточной инженерии, например, позволило разработать технологии получения безвирусных растений (например, картофеля) путем регенерации целого растения из одной соматической клетки. Ученые работают над изменением генотипов злаков. Они вводят в их генотипы специальный ген бактерий, который будет способствовать усвоению азота из атмосферного воздуха. Решение этой проблемы позволило бы сократить затраты средств на производство азотных удобрений.

культуральн жидкость - Культура кл - Биомасса

Дезинтеграция

Гомогенат клеток

Отделение продукта

Концентрирование

Обезвоживание

Стабилизация

Целевой продукт

Предварительная обработка – действия улучшающие культуру клеток (изменен п-аш, воздействие температуры, добавление активных белковых компонентов)

Способы:

Флотация – если клетки плохо смачиваются и накапливаются в верхнем слое. Чаще используются для отделения дрожжевых клеток. Преимущества : экономические , высокая продуктивность

Фильтрация: применен различных фильтров. Метод задержания биомассы, но пропуск жидкость. Недостаток6 быстрая забиваемость фильтров.

Центрифугирование: осаждение взвешенных частиц в центрифугах. Требует сложного оборудования. Используют , если культура оседает или всплывает медленно