ИЗОЛИРОВАНИЕ

Фармацевтический факультет

__________________________

Кафедра фармацевтической химии и фармакогнозии

Химико-токсикологический анализ на группу веществ,

Изолируемых экстракцией и сорбцией

(барбитураты)

Учебно–методическое пособие для студентов 4 курса
фармацевтического факультета

Количество часов:

Лекционных – 2

Лабораторно-практических - 10

Нижний Новгород

Химико-токсикологический анализ на группу веществ, изолируемых экстракцией и сорбцией (барбитураты). Учебно–методическое пособие для студентов 4 курса фармацевтического факультета – Нижний Новгород: изд-во Нижегородской государственной медицинской академии, 2009.

Учебно-методическое пособие составлено для студентов 4 курса фармацевтического факультета. В пособии рассмотрены метод изолирования барбитуратов из биологического материала, их качественное и количественное определение, обнаружение и разделение методом ТСХ.

Рекомендовано к изданию ЦМС Нижегородской государственной медицинской академии (протокол № 1 от 16.02.09).

Составители: С.А. Гаврилова, Л.Н. Карякина, Н.Б. Мельникова, Т.В. Саликова.

Рецензенты:

С.А. Гаврилова,

Л.Н. Карякина,

Н.Б. Мельникова,

Т.В. Саликова

Химико-токсикологический анализ на группу веществ,

Изолируемых экстракцией и сорбцией

(барбитураты)

ВВЕДЕНИЕ

Производные барбитуровой кислоты – барбитал, фенобарбитал, барбамил, этаминал-натрия, бутобарбитал и бензонал – извлекаются из кислого раствора органическим растворителем. В качестве биологического материала берется содержимое желудка, печень, почки, моча.

ИЗОЛИРОВАНИЕ

Изолирование подкисленным спиртом.

Измельченный объект (100 г) (если объект полужидкий – упаривают на водяной бане 40 ⁰С до густоты сиропа; если объект жидкий – извлекают органическим растворителем сначала из кислого раствора, затем из щелочного) помещают в колбу с притертой пробкой и заливают 96% спиртом с таким расчетом, чтобы твердые части объекта были полностью покрыты им; полученную смесь подкисляют 5 – 10 % спиртовым раствором щавелевой кислоты до pH 2,5 – 3 и оставляют до следующего дня при периодическом взбалтывании.

На следующий день при сохранившейся кислой реакции объекта исследования спиртовое извлечение фильтруют через складчатый фильтр, предварительно смоченный спиртом (реакция извлечения должна быть кислой), и собирают в фарфоровую чашку емкостью 200 – 250 мл, выпаривают на водяной бане до густоты сиропа при температуре не выше 40 – 50 ⁰С.

Рис. 1. Схема изолирования из биологического материала.

В сиропообразном остатке производят осаждение белков, для чего остаток повторно обрабатывают 96 % спиртом, приливая его тонкой струйкой, а затем по каплям и непрерывно перемешивая жидкость стеклянной палочкой; спирт добавляется до тех пор, пока следующая капля спирта не перестанет вызывать помутнение жидкости. Образовавшемуся осадку дают отстояться в течение 10 – 15 минут и отфильтровывают его через гладкий маленький фильтр (5 – 6 см в диаметре), предварительно смоченный спиртом.

Остаток на фильтре промывают (по каплям) несколькими миллилитрами спирта. Фильтрат собирают в фарфоровую чашечку, сгущают его на водяной бане до густоты сиропа и снова повторяют операцию осаждения белков.

Операцию осаждения белков производят несколько раз (2 – 3 раза и более) до тех пор, пока спирт не перестанет что-либо осаждать.

В последний раз вытяжку выпаривают на водяной бане до густоты сиропа, остаток растворяют в 25 – 30 мл горячей дистиллированной воды (~50 ⁰С) и мутный раствор фильтруют через небольшой гладкий фильтр, смоченный водой.

Фильтрат собирают в делительную воронку и трижды экстрагируют его хлороформом (15, 10 и 10 мл).

Соединенные вместе хлороформные извлечения фильтруют через маленький фильтр с безводным сульфатом натрия, смоченный хлороформом, и помещают в маленькую сухую колбу (на 25 мл), которую снабжают этикеткой «Извлечение из кислого раствора».

Водный остаток в делительной воронке подщелачивают 25 % раствором аммиака до pH 8,5 – 9 и вновь извлекают 3 порциями хлороформа (15, 10 и 10 мл).

С объединенными хлороформными извлечениями поступают, как указывалось выше. После фильтрования их помещают в сухую колбу и снабжают этикеткой «Извлечение из щелочного раствора».