Студопедия

КАТЕГОРИИ:

АвтомобилиАстрономияБиологияГеографияДом и садДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеталлургияМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРелигияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияТуризмФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника



Типы микроскопов и принципы микроскопии; правила работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы

Читайте также:
  1. C2 Покажите на трех примерах наличие многопартийной политической системы в современной России.
  2. FDDI. Кадр. Процедуры управления доступом к кольцу и инициализации работы кольца.
  3. I. Задачи настоящей работы
  4. I. Общие правила
  5. I. Общие правила
  6. I. Правила терминов
  7. I. ПРАВИЛА ЧТЕНИЯ В АНГЛИЙСКОМ ЯЗЫКЕ
  8. II. Организация выполнения курсовой работы
  9. II. Основные правила черной риторики
  10. II. Основные принципы и правила служебного поведения государственных гражданских служащих Федеральной налоговой службы

Микроскопический метод исследования - это изучение под микроскопом окрашенных препаратов из исследуемого материала:

Достоинства:

-быстрый;

-ранний.

Недостатки:

-неточный (ориентировочный)

Световой микроскоп состоит из частей:

 

механическойоптической

предназначена для устойчивости предназначена для освещения и уве-

прибора, удобства пользования: личения объектов:

- подставка (ножка) Осветительный аппарат

- тубусодержатель находится под предметным столиком

- тубус - зеркало плосковогнутое (при искус-

- револьвер ственном освещении используется

- предметный столик вогнутая сторона зеркала)

- макровинт - диафрагма (регулирует объем

- микровинт светового пучка)

- конденсор (в фокусе конденсора

собираются параллельные лучи света)

Для увеличения:

- объективы:

малый ´8

большой ´40

иммерсионный ´90

- окуляры:

´7, ´10, ´15 раз

 

Общее увеличение микроскопа равно произведению увеличения объектива на увеличение окуляра.

Разрешающая способность микроскопа определяется размером наименьшего объекта, который можно увидеть в данный микроскоп.

Для световых микроскопов разрешающая способность – 0,2 мкм, для электронного - в 100-1000 раз выше.

Системы микроскопии

сухаяиммерсионная

-между объектом и объективом - между объектом и объекти-

находится воздух; вом - жидкость (масло, вода);

- используется для изучения крупных - используется для изучения

биологических объектов (ботанических, микроорганизмов;

гистологических);

- максимальное увеличение объекти- - увеличение объектива ´90;

ва ´40;

- создает недостаточную освещенность, - достигается лучшая освещен-

т.к. луч света проходит через неоднород- ность, т.к. иммерсионное масло

ную среду: стекло- воздух; коэффициен- и стекло имеют почти одинаковый

ты преломления лучей света которых коэффициент преломления лучей

соответствуют 1,52 и 1,0, в результате света (1,515 и 1,52), что создает

чего происходит преломление и однородную среду и рассеивания

отклонение лучей света. лучей света не происходит.

 

 



Y Y

линза n=1,52 линза B n=1,52

воздух C n=1,0 масло C n=1,515

B

стекло n=1,52 стекло n=1,52

C C

B B

Преимущества иммерсионной системы

1. Большее увеличение (увеличивает в 90 раз вместо 40 в сухой системе микроскопии)

2. Лучшая освещенность за счет создания однородной среды для прохождения лучей света с помощью иммерсионного масла

Правила работы с микроскопом при использовании иммерсионной системы:

  1. Настроить освещение микроскопа, используя вогнутое зеркало и объектив.
  2. На приготовленный и окрашенный мазок на предметном стекле нанести каплю иммерсионного масла и поместить его на предметный столик, укрепив зажимами.
  3. Повернуть револьвер до отметки иммерсионного объектива 90 х.
  4. Осторожно погрузить объектив в каплю масла под углом бокового зрения.
  5. Установить ориентировочный фокус при помощи макрометрического винта.
  6. Провести окончательную фокусировку препарата микрометрическим винтом, вращая его в пределах только одного оборота. Нельзя допускать соприкосновения объектива с препаратом, так как это может повлечь поломку покровного стекла или фронтальной линзы (свободное расстояние иммерсионного объектива 0,1-1мм).
  7. По окончании работы микроскопа необходимо вытереть масло с иммерсионного объектива и перевести револьвер на малый объектив 8х.

 



- Фазово-контрастное устройствоможет быть установлено на любом микроскопе. Фазово-контрастная микроскопия основана на явлении интерференции света, прошедшего и не прошедшего через объект, и позволяет наблюдать прозрачные объекты, отличающие­ся от окружающей среды (или других структур клетки) по показателю преломления или по толщине и вызывающие изменение фазы прошедшего через них света. Благодаря специ­альному приспособлению в объективе (фазовая пластинка) и в конденсоре (кольцевая диафрагма) эти объекты выглядят более темными (позитивный фазовый контраст) или более светлыми (негативный фазовый контраст) по сравнению с окружающей средой.

- Темнопольная микроскопия (ультрамикроскопия) основана на явлении светорас­сеивания. При темнопольной микроскопии в объектив попадают только лучи, рассеянные объектом, и не попадают прямые лучи от осветителя. Поэтому наблюдаемые микроорга­низмы кажутся ярко светящимися на темном фоне.

 

Темнопольную микроскопию применяют для прижизненного изучения лептоспир, спиро­хет, а также микроорганизмов слишком мелких, чтобы их можно было различить при обычном светлопольном освещении. Для темнопольной микроскопии используют обыч­ные объективы и специальные темнопольные конденсоры.

- Люминесцентная микроскопия основана на использовании явления флюоресцен­ции. Применяют специальные люминесцентные микроскопы или приспособления к обыч­ным микроскопам. Так как большинство микроорганизмов не обладает собственной люминесценцией, то их предварительно окрашивают (флюорохромируют) сильно разве­денными растворами специальных красителей (флюорохромы), которые связываются с определенными структурами клетки.

Люминесцентную микроскопию применяют также для выявления антигенов и антител. С этой целью используют метод иммунофлюоресценции (люминесцентно-серологический метод). Этот метод позволяет выявить в препарате микробы, содержащие определенные антигены. Для их обнаружения необходимо иметь антисыворотки, содержащие антитела к этим антигенам (к антисывороткам химическим путем присоединены молекулы флюоро-хромов - люминесцирующие сыворотки). На фиксированный препарат во влажной камере наносят люминесцирующую сыворотку, инкубируют, промывают раствором хлорида натрия, высушивают и рассматривают в люминесцентном микроскопе. Если в препарате есть микробы, содержащие антиген, антитела к которому были в люминесцирующей сыворотке, они ярко светятся. Остальные микробы не люминесцируют.

- Электронная микроскопия. Изображение в электронном микроскопе образуется не с помощью световых лучей и стеклянных линз, а с помощью потока электронов, который фокусируется электрическим или магнитным полем. Разрешающая способность примерно в 2000 раз больше, чем светового (0,2 мкм), и с его помощью можно увидеть даже крупные молеку­лы. Применение электронного микроскопа значительно расширило знания о вирусах, фагах и других микроорганизмах.

Теоретическая справка


Дата добавления: 2015-01-01; просмотров: 41; Нарушение авторских прав


<== предыдущая лекция | следующая лекция ==>
В случае воспламенения спирта огонь тушить асбестовой тканью, полотенцем. | Морфология грибов и методы их изучения
lektsii.com - Лекции.Ком - 2014-2019 год. (0.01 сек.) Все материалы представленные на сайте исключительно с целью ознакомления читателями и не преследуют коммерческих целей или нарушение авторских прав
Главная страница Случайная страница Контакты