Методы культивирования клеток высших растений.

С тех пор как удалось индуцировать регенерацию целого рас-тения из отдельной клетки, техника культуры клеток стала все шире применяться для клонирования. Если обработать растительные клетки ферментами, разрушающими клеточную стенку, такими, как

целлюлаза и пектиназа, можно добиться получения протопласта. Если культивировать протопласты на соответствующей среде, мож-но добиться их деления. В результате деления протопласты форми-руют каллус, способный к регенерации с образованием целого рас-

тения. В результате таких экспериментов можно получить целое растение всего из одной клетки материнского растения. Полученные растения -регенеранты будут сходны с родительскими линиями как по генотипу, так и по фенотипу. Таким образом, техника получения

растений из протопластов позволяет преодолеть обычную изменчи- вость. Характерную для других способов получения клонов. На практике описанная методика в настоящее время используется при производстве элитного посадочного материала табака, картофеля, маниоки и сои.

Техника слияния протопластов позволяет получить самые разнообразные растительные гибриды, даже между растениями, принадлежащими к разным родам. Эта весьма перспективная техни-ка не зависит от обычного полового размножения, посредством ко-

торого удалось, хотя и с большим трудом, получить гибриды пше-ницы с рожью (тритикале) и репы с капустой (рафанобрассика). Так было проведено успешное слияние протопластов картофеля и тома-тов. В результате получен новый гибридный вид «поматы». Эти рас-

тения образуют такие же большие клубни, как и картофель, но го-раздо более крупные плоды, содержащие алкалоиды (томатин и со-ланин), унаследованные от томатов. В настоящее время разработаны методы регенерации растений из гибридных клеток после слияния протопластов. Этим методом уже получено множество гибридов де- коративных, овощных, зерновых и кормовых видов культурных рас-тений.

Метод флотации: клетки продуцента обл. небольшой смачивостью и клетки продуцент. Накапливаются в верхних слоях биореактора, Доб. ПАВ – образуется пена – собирают пену в пеноприлы + экономичность.

Метод фильтрации: использ различные фильтры. Принцип задержания биомассы: диаметр пор уменьш. Р-ра культивируемых клеток. Биомассу с фильтра снимаем струей воздуха или спец. Лопатками.

Метод центрифугирувания: осаждение частиц культ. Жидкости с применением центорбежной силы. Но это очень дорого, зато – эффективно.

РАЗРУШЕНИЕ КЛЕТОЧНЫХ стенок:

§ Физические методы(жидкая среда: ультразвук, замораживание, мельницы; твердая среда: прессы/шаровая мельница)