Теоретические основы. Потребляемый из среды минеральный азот используется дрожжами для построения азотсодержащих органических соединений клетки

Потребляемый из среды минеральный азот используется дрожжами для построения азотсодержащих органических соединений клетки. В основном это белки, нуклеиновые кислоты и их основания, свободные аминокислоты.

Для определения содержания общего азота в биомассе дрожжей применяют метод Квельдаля, основанный на окислении органического вещества при сжигании его в концентрированной серной кислоте. При этом углерод и водород окисляются кислородом, выделяющимся при разложении серной кислоты, до диоксида углерода и воды. Азот белковых и близких к ним веществ отделяется в виде аммиака и сохраняется в растворе, так как, реагируя с избытком серной кислоты, переходит в аммиачную соль этой кислоты, по

реакции:

В начале сжигания органическая масса обугливается, принимая чёрный цвет; при полном же сжигании раствор становится прозрачным. Полученный в результате сжигания раствор сернокислого аммония в серной кислоте подщелачивается. Под влиянием щёлочи при нагревании аммиак улетучивается и улавливается в приёмнике уже титрованной серной кислотой, с которой опять образует соль. Количество азота рассчитывают по выделившемуся аммиаку с последующим вычислением содержания сырого протеина.

Однако такой расчёт содержания белка даёт завышенные результаты, т.к. при определении содержания общего азота сжиганием учитывается не только азот белка, но и свободных аминокислот, нуклеиновых кислот и их оснований, минеральный азот и т.д. Для более точного определения содержания белка в биомассе микроорганизмов применяют метод предварительной обработки биомассы некоторыми реактивами, позволяющими осадить белок и удалить небелковый азот с последующим определением белкового азота. Для этого применяют гидрат оксида меди (метод Бернштейна), раствор уксуснокислого свинца, трихлоруксусную (ТХУ) кислоту.

Исходя из содержания азота в белке, вычислен эмпирический коэффициент пересчёта общего или белкового азота на белок или сырой протеин. Установлено, что большинство растительных белков содержит 6 масс азота, поэтому коэффициент пересчёта общего азота на белок равен 6,26. Этот же коэффициент принят и для пересчёта и определения сырого протеина в микробиологической промышленности.