Витальные (прижизненные) методы исследований

Эти методы исследований дают возможность получить информацию каким образом в клетках, тканях, органах происходят процессы жизнедеятельности, проследить движение, деление, рост, взаимодействие клеток, их реакцию на действие различных факторов.

При исследовании живых клеток используют методы витального и суправитального окрашивания, используя специальные не токсические для живых тканей красители.

При витальном окрашивании краситель вводят в организм живого организма и он избирательно окрашивает определенные клетки. Таким образом проводят исследования макрофагической системы, введением трипанового синего, или литиевого кармина.

Суправитальное окрашивание - это окрашивание живых клеток изолированных от организма.

Таким образом определяют:

~лизосомы - краситель нейтральный красный;

~митохондрии - янус зеленый;

~ретикулоциты - диамант-крезиловый синий.

При витальном, суправитальном, а также поствитальном исследовании неокрашенных гистологических структур, используют ряд специальных методов световой микроскопии:

1) Фазовоконтрастную;

2) Темнополевую;

3) Флуоресцентную.

В последнее время существенное значение имеют методы гистохимии, авторадиографии, иммуноморфологии, цитоспектрофотометрии.

Гистохимические методы позволяют определить локализацию различных химических соединений в клетке и их структурных компонентов, а также их количественное содержание.

Авторадиоографический метод. В основе этого метода лежит использование радиоактивных изотопов и меченых ими соединений. Эти соединения вводятся в организм, а потом радиоактивные вещества обнаруживают на срезах при помощи специального оборудования.

Иммуногистохимические методы основаны на реакциях антиген-антитело. Известно, что каждая клетка организма имеет специальный антигенный состав, который в большинстве определяется белками. Путем иммунизации можно получить соответствующие антигенам антитела. Антитела связывают с флюорохромами или ферментами. После специальной обработки исследованных препаратов в местах локализации соответствующих антигенов концентрируются молекулы меченых антител, которые обнаруживают благодаря свечению или вследствие образования окрашенных структур в гистохимической реакции.

Цитоспектрофотометрия - метод позволяющий проводить количественное измерение содержания различных веществ в клетке на основе изучения спектров поглощения ими световых лучей.

Метод проточной цитометрии - позволяет анализировать характеристики клеток в суспензии, которую пересекает сфокусированный лазерный луч.

Таким образом, вышеизложенное еще раз свидетельствует о том, что гистология является одной из фундаментальных морфологических дисциплин и по сути является базовой в теоретической подготовке врача.