Выводы по разделу. Таким образом, для получения одного из наиболее важных иммунохимических компонентов иммунохроматографической тест-системы (конъюгата КЗ с антителами)

Таким образом, для получения одного из наиболее важных иммунохимических компонентов иммунохроматографической тест-системы (конъюгата КЗ с антителами), предназначенной для выявления Helicobacter pylori, целесообразно провести ряд последовательных экспериментальных исследований по отработке условий синтеза сферических, однородных частиц коллоидного золота размером 30 нм, наиболее оптимальных по данным литературы для приготовления конъюгата с антителами. Путем постановки «золотого числа» определить оптимальную концентрацию выбранных моноклональных антител для последующей конъюгации с экспериментально обоснованными кондиционными сериями препаратов коллоидного золота, которые были получены по разработанной в дипломной работе методике.

Техническое обоснование темы. Задачи дипломной работы

Целью исследования явилось теоретическое и экспериментальное обоснование состава конъюгата коллоидного золота с антителами для разработки иммунохроматографической тест-системы, предназначенной для идентификации H. рylori.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

— теоретически обосновать и экспериментально отработать методику приготовления наночастиц коллоидного золота с диаметром 30 нм;

— с использованием метода электронной микроскопии и спектрофотометрии провести оценку полученных серий коллоидного золота и выбрать кондиционные серии коллоидного золота;

— провести оценку адсорбционной способности серий коллоидного золота с моноклональными антителами;

— теоретически и экспериментально обосновать состав конъюгата коллоидного золота с антителами для разработки иммунохроматографической тест-системы, предназначенной для идентификации H. pylori.

Раздел теоретических и экспериментальных исследований

Материал, реактивы, оборудование и методы

Материал

– золотохлористоводородная кислота (HAuCl₄·3H₂O) 520918-1G («Sigma», США);

– мышиные моноклональные антитела к белку CagA Helicobacter pylori («Биалекса», Россия):

· клон HP–387,

· клон HP–1811;

– антитела поликлональные кроличьи IgG pab Rabbit anti H. pylori («БиоТест системы, Россия).

Реактивы

– дистиллированная вода (ГОСТ 6709-72);

– деионизированная вода;

– спирт этиловый 96% (ГОСТ 5962-67);

– 5% раствор перекиси водорода (Россия);

– цитрат натрия (Na₃C₆H₅O₇×5,5H₂O) («Вектон», Россия);

– карбонат натрия (Na₂CO₃) (ГОСТ 83-79, ЗАО «Химреактив», Россия);

– гидрокарбонат натрия (NaHCO₃) (ГОСТ 4201-79, «Вектон», Россия).