Возникновению микозов. Возбудители поверхностных, системных (глубоких) и плесневых микозов. Принципы этиологической диагностики микозов.

Патогенные грибы: классификация, характеристика. Условия, способствующие

возникновению микозов. Возбудители поверхностных, системных (глубоких) и плесневых микозов. Принципы этиологической диагностики микозов.

Грибы. Домен – EUKARYA, царство – FUNGI (МYCETES, МYCOTA).

Многоклеточные или одноклеточные, нефотосинтезирующие (бесхлорофилльные), эукариотические микроорганизмы с клеточной стенкой. Широко распространены в природе, особенно в почве.

Общая характеристика грибов

- Имеют ядро с ядерной оболочкой, цитоплазму с органеллами, ЦПМ и многослойную, ригидную клеточную стенку, состоящую из нескольких типов полисахаридов (маннанов, глюканов, целлюлозы, хитина), а также белка, липидов и др.

- Некоторые грибы образуют капсулу.

- ЦПМ содержит гликопротеины, фосфолипиды и эргостеролы (в отличие от холестерина — главного стерола тканей млекопитающих).

- Являются грамположительными МО, вегетативные клетки - некислотоустойчивые.

Гифальные (плесневые) грибы

• Образуют ветвящиеся тонкие нити (гифы), сплетающиеся в грибницу, или мицелий (плесень). Толщина гиф колеблется от 2 до 100 мкм. Гифы, врастающие в питательный субстрат, называются вегетативными гифами (отвечают за питание гриба), а растущие над поверхностью субстрата - воздушными или репродуктивными гифами (отвечают за бесполое размножение).

• Гифы низших грибов не имеют перегородок. Они представлены многоядерными клетками и называются ценоцитными (от греч. koenos - единый, общий).

• Гифы высших грибов разделены перегородками или септами с отверстиями.

Дрожжевые грибы (дрожжи)

• В основном, имеют вид отдельных овальных клеток (одноклеточные грибы).

• По типу полового размножения распределены среди высших грибов - аскомицет и базидиомицет. При бесполом размножении дрожжи образуют почки или делятся, что приводит к одноклеточному росту. Могут образовывать псевдогифы и ложный мицелий (псевдомицелий) в виде цепочек удлиненных клеток – «сарделек».

• Грибы, аналогичные дрожжам, но не имеющие полового способа размножения, называют дрожжеподобными. Они размножаются только бесполым способом - почкованием или делением.

Диморфизм грибов.

Многие грибы характеризуются диморфизмом - способностью к гифальному (мицелиальному) или дрожжеподобному росту, в зависимости от условий культивирования. Например, в инфицированном организме они растут в виде дрожжеподобных клеток (дрожжевая фаза), а на питательных средах образуют гифы и мицелий. Такая реакция связана с температурным фактором: при комнатной температуре образуется мицелий, а при 37оС (при температуре тела человека) - дрожжеподобные клетки.

Размножение грибов

Половое размножение:

• образованием гамет

• половых спор

• других половых форм

Половые формы называются телеоморфами

Бесполое (вегетативное) размножение:

• почкование

• фрагментация гиф

• бесполое спорообразование (с образованием соответствующих форм, называемых анаморфами)

Эндогенные споры (спорангиоспоры) созревают внутри округлой структуры - спорангия.

Экзогенные споры (конидии) формируются на кончиках плодоносящих гиф, так называемых конидиеносцах.

Основные типы конидий.

• Артроконидии (артроспоры), или таллоконидии образуются путем равномерного септирования и расчленения гиф;

• Бластоконидии образуются в результате почкования.

• Одноклеточные небольшие конидии называются микроконидиями.

• Многоклеточные, большие конидии называются макроконидиями.

• К бесполым формам грибов относят также хламидоконидии, или хламидоспоры (толстостенные крупные покоящиеся клетки или комплекс мелких клеток) и склероции (твердая масса клеток с оболочкой) - покоящиеся органы грибов, способствующие их выживанию в неблагоприятных условиях.

Ботаническая классификация грибов (6 основных классов):

1. Хитридиомицеты – наиболее примитивные. Тело состоит из комочка протоплазмы без оболочки, мицелия не образуют. Живут в воде и почве, паразитируют на высших растениях. Патогенных для человека видов нет.

2. Оомицеты – водные и земные формы. Хорошо развитый одноклеточный несептированный мицелий. Паразитируют на высших растениях, патогенных для человека видов нет.

3. Зигомицеты – есть патогенные для человека

4. Аскомицеты – есть патогенные для человека

5. Базидиомицеты – есть патогенные для человека

6. Дейтеромицеты – есть патогенные для человека

Зигомицеты

- Относятся к низшим грибам (фикомицетам) с несептированными гифами.

- Роды: Mucor, Rhizopus, Absidia, Rhizomucor, Basidiobolus, Conidiobolus.

- Широко распространены в почве, воздухе, пище, на гниющих растениях, плодах. Споры грибов проникают в организм аэрогенным механизмом или при контакте с травмированными тканями ЖКТ (алиментарным путем) и кожи (контактным путем).

- Вызывают зигомикоз (фикомикоз) у иммунодефицитных лиц (инвазивный легочный зигомикоз, поражение ЖКТ, кожи, мозга и др.).

Аскомицеты

- Аскомицеты (сумчатые грибы) имеют септированный мицелий. Свое название они получили от основного органа плодоношения - сумки, или аска, содержащего 4 или 8 гаплоидных половых спор (аскоспор).

- К аскомицетам относятся отдельные представители (телеоморфы) родов Aspergillus, Penicillium и др.
- Большинство являются анаморфами, то есть размножаются только бесполым путем.

1. У грибов рода Aspergillus (леечная плесень) на концах плодоносящих гиф, конидиеносцах, имеются утолщения - стеригмы, фиалиды на которых образуются цепочки бесполых спор (конидии). Некоторые виды аспергилл могут вызывать аспергиллезы и афлатоксикозы.

2. У грибов рода Penicillium (кистевик) плодоносящая гифа напоминает кисточку, т. к. из нее (на конидиеносце) образуются утолщения, разветвляющиеся на более мелкие структуры - стеригмы, фиалиды на которых находятся цепочки конидий. Пенициллы могут вызывать заболевания - пенициллиозы.

3. Дрожжи - одноклеточные грибы, утратившие способность к образованию истинного мицелия. Дрожжи имеют овальную форму клеток с диаметром 3 - 15мкм. Они размножаются почкованием, бинарным делением на две равные клетки или половым путем с образованием аскоспор. Заболевания, вызываемые некоторыми видами дрожжей, получили название дрожжевых микозов.
4. Возбудитель эрготизма (спорынья Claviceps purpurea).

5. Многие виды аскомицетов являются продуцентами антибиотиков, используются в биотехнологии.

Базидиомицеты

- Шляпочные грибы, имеют септированный мицелий. Они образуют базидиоспоры путем отшнуровывания от базидия - концевой клетки мицелия, гомологичной аску.

- К базидиомицетам относятся некоторые дрожжи, например, телеоморфы Cryptococcus neoformans.

Дейтеромицеты

- Несовершенные грибы, Fungi imperfecti, являются условным, формальным классом грибов, который объединяет грибы, не имеющие полового размножения.

- Они образуют септированный мицелий, размножаются только бесполым путем в результате формирования конидий.

- Большинство грибов, вызывающих заболевания у человека (микозы), относится к дейтеромицетам.

Грибы Candida albicans

КЛИНИЧЕСКАЯ КЛАССИФИКАЦИЯ ГРИБОВ

ü Возбудители поверхностных микозов (кератомикозов)

ü Возбудители эпидермофитий (дерматомикозов)

ü Возбудители подкожных или субкутанных микозов

ü Возбудители системных или глубоких микозов

ü Возбудители оппортунистических микозов

ü Возбудители микотоксикозов

ü Неклассифицированные грибы

Возбудители поверхностных микозов (кератомикозов)

- Возбудителями являются кератомицеты – малоконтагиозные грибы, поражающие поверхностные отделы рогового слоя эпидермиса и поверхность волоса.

- Микробиологическая диагностика кератомикозов: микроскопическим методом выявляют возбудителей в клиническом материале после обработки щелочью, препараты красят метиленовым синим и др. Культивирование проводят на средах Сабуро, глюкозо-пептон-дрожжевом агаре и др. Рост отмечается через неделю.

1. Malassezia furfur (Pityrosporum orbiculare (ovale) - Пестрый лишай, отрубевидный лишай – в роговом слое эпидермиса короткие, изогнутые гифы и дрожжеподобные клетки.

Культуру получают на среде с плацентарной кровью, кокосовым, оливковым маслом. Она дрожжевидная, желтовато-зеленая или коричневатая.

Клиника: пятна располагаются вокруг устьев волосяных фолликулов с преимущественной локализацией на коже шеи, груди, верхней части спины и живота. Имеют наклонность к периферическому росту и при слиянии образуют крупные очаги, обычно более интенсивно окрашенные.

Диагностическое значение имеет проба Бальцера: смазывание очагов 5 % раствором

йода, что приводит к более интенсивному окрашиванию за счет разрыхления рогового слоя эпидермиса.

2. Exophiala werneckii - Черный лишай – в роговом слое эпидермиса темные септированные гифы и почкующиеся клетки.

3. Piedraia hortae - Черная пьедра – на волосе черные узелки, содержащие аски.

Возбудитель черной пьедры образует аски, колонии имеют зеленовато-черный или черный цвет.

На волосах образуются мелкие твердые узелки (до 20 – 30 и более), почти полностью охватывающие волос. Иногда они сливаются, образуя муфту, состоящую из крепко склеенного мицелия и спор гриба. Узелки имеют буроватый или коричневый цвет, иногда имеют красноватый или сероватый оттенок.

4. Trichosporon beigelii - Белая пьедра (трихоспороз) – желтые узелки вокруг волос, содержащие фрагменты мицелия и артроконидии.

Возбудитель белой пьедры довольно быстро растет, образуя колонии серовато-желтого или коричневого цвета.

На волосах образуются мелкие твердые узелки (до 20 – 30 и более), почти полностью охватывающие волос. Иногда они сливаются, образуя муфту, состоящую из крепко склеенного мицелия и спор гриба. Узелки более светлые, серовато-желтоватые или молочно-матовые.

Возбудители эпидермофитий (эпидермомикозов, дерматомикозов).

- Дерматофиты или дерматомицеты поражают кожу, ногти и волосы, вызывая трихофитию, микроспорию, фавус, эпидермофитию и др.

- Около 40 видов дерматофитов вызывают болезни у человека. Обитают на ороговевших субстратах (кератинофильные грибы). Согласно способам споруляции относятся к З родам: Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton.

- Являются патогенными, высококонтагиозными грибами. Путь передачи - контактный.

- Группы дерматомицетов:

• антропофильные - передающиеся от человека к человеку;

• зоофильные - передающиеся от животного человеку;

• геофильные - обитающие в почве и передающиеся при контакте с ней.

- Морфология и физиология дерматофитов

• Образуют септированный мицелий с артроконидиями, хламидоспорами, макро- и микроконидиями.

• Макроконидии различны: у рода Trichophyton - крупные, гладкие, септированные; у рода Microsporum - толстостенные, многоклеточные, веретенообразные и покрыты шипами; у рода Epidermophyton имеется множество гладких дубинкообразных макроконидий.

• Грибы размножаются бесполым путем (анаморфы). Некоторые из них могут размножаться половым путем (телеоморфы), образуя аски.

• Растут на среде Сабуро и др. Колонии (в зависимости от вида) разноцветные, мучнистые, зернистые, пушистые.

- Микробиологический диагноз дерматофитов

• Применяют микроскопический, микологический (культуральный), аллергический, серологический и биологической методы диагностики.

• Микроскопируют соскобы с пораженной кожи, чешуйки, ногтевые пластинки, волосы, обработанные в течение 10-15 мин 10-15% раствором КОН. Препараты окрашивают метиленовым синим, гематоксилин-зозином. Можно применять РИФ с помощью флюоресцирующих АТ.

• При микроскопии выявляют нити мицелия, артроконидии, макро- и микроконидии, бластоспоры.

• При микологическом методе делают посев на питательные среды - сусло-агар, Сабуро и др. Рост грибов изучается через 1-З недели культивирования при 25 градусах С.

• В серологическом методе диагностики определяют антитела в сыворотке крови с помощью РСК, РПГА, РП, РИФ, ИФА.

• При аллергологической диагностике ставят кожно-аллергические пробы с аллергенами из грибов.

• Биопробу ставят на лабораторных животных (морские свинки, мыши и др.), заражая их в кожу, волосы и когти.

1. Epidermophyton Floccosum – возбудитель эпидермофитии

Возбудитель образует характерные колонии плоской или куполообразной формы, имеющие углубления в центре. Цвет молодых колоний лимонно-желтый или с зеленоватым оттенком, а более зрелых – серый.

2. Trichophyton interdigitale

Колонии с высоким белым пушком, в старых культурах – мелкопорошковатые; обратная сторона коричневая. Микроскопия: немного овальных, грушевидных, палочковидных микроконидий. Макроконидии многокамерные, тупые, нередко отсутствуют.

Интертригинозная форма, когда в III, IV межпальцевых складках стоп появляется краснота, шелушение, мацерация с четкими границами. В глубине складок образуются трещины, которые превращаются в эрозии.