ДИАГНОСТИКА БАКТЕРИЙ РОДА Helicobacter В КАМНЯХ

Бактерии рода Helicobacter колонизируют желудочно-кишечный тракт человека и животных. Представители этого рода могут быть ассоциированы с хроническими заболеваниями желудочно-кишечного тракта. Некоторые представители рода Helicobacter были выделены из желудков хорьков, собак, кошек и обезьян. Другие виды хеликобактеров были выделены из тонкой кишки, фекалий и печени людей и животных, и были названы внепеченочными хеликобактерами (enteruhepatic helicobacters). Так, например, H.canis был выделен у собак и людей с диареей. H.rappini был выделен из крови у людей при бактериемии. H.pullorum был выделен из печени и фекалий циплят и из фекалий при диареи у людей. Было также показано, что H.fennelliae и H.cinaedi ассоциированы с колитом, проктитом и могут быть выделены при бактериемии у людей с иммунодефицитом. У мышей H.hepaticus и H.bilis ассоциированы с хроническим и активным гепатитом и воспалительным процессом в желчном пузыре. H.hepaticus также может быть причиной развития рака печени у мышей. H.cholecystus был выделен из печени хомяков с холангиофиброзом и панкреатитом. H.muridarum, H.rappini, H.trogontum и H.rodentium колонизируют тонкий кишечник грызунов. До сих пор остается открытым вопрос, могут ли бактерии рода Helicobacter при колонизации тонкой кишки оказывать на нее неблагоприятное воздействие. Однако, H.muridarum колонизируя желудок грызунов может вызывать у них гастрит.

Таким образом, диагностика инфекции, вызванной бактериями рода Helicobacter, необходима, прежде всего, для того, чтобы детально изучать патогенез хеликобактериоза и его клиническую картину. В настоящее время все большее внимание уделяется диагностике и изучению клинических проявлений внепеченочных форм хеликобактериоза. Из-за биохимического и морфологического сходства в пределах гена Helicobacter дифференциация и таксономическая классификация хеликобактеров основана на определении участка гена 16S рРНК.

«Helicobacter pylori - инфекция» 20

Fox J.G. и соавт. недавно показали, что некоторые представители рода Helicobacter могут колонизировать желчный тракт у людей с хроническим гепатитом. В этой работе были проанализированы образцы желчи и ткани желчных пузырей, полученных от 23 Чилийцев с хроническим гепатитом. При проведении ПЦР исследования на 16SрРНК в 13 из 23 образцов желчи и в 9 из 23 образцов ткани желчных пузырей были верифицированы бактерии рода Helicobacter. На основании определения нуклеотидной последовательности 8 ПЦР-продуктов в 5-ти случаях был определен H.bilis, который вызывает гепатит у мышей, в одном случае был определен H.pullorum, вызывающий гепатит у цыплят, а в 2-х

случаях определен Flexispira rappini.

В нашем исследовании мы попытались установить могут ли бактерии вообще и в частности бактерии рода Helicobacter присутствовать в камнях при желчно-каменной болезни у людей.

Результаты идентификации бактерий в желчных камнях у детей, инфицированных H.pylori, представлены в Таблице. Анализ нуклеотидных последовательностей ДНК отобранных клонов показал, что микрофлора камней имеет смешанный характер. В каждом из 7-ми исследованных камней верифицировалась ДНК не менее 4-х бактерий. Фрагмент ДНК, специфический для Helicobacter spp, был определен в 5-ти клонах, в 4-х клонах был определен фрагмент ДНK Campylobacter spp, в 5-ти клонах – фрагмент ДНК Acinetobacter spp, в 5-ти клонах – фрагмент ДНК Bacteroides spp,

в 3-х клонах - фрагмент ДНК эубактерий и в двух клонах – фрагмент ДНК Klebsiella spp. В 11-ти клонах верифицирован фрагмент ДНК, характерный для геномов некультивируемых протеобактерий. В единичных клонах верифицированы фрагменты ДНК, cпецифичные для Pseudomonas spp., Porphyromonas spp, Prevotella spp, Corynebacterium spp. Следует также отметить, что ДНК некультивируемых бактерий присутствовала во всех исследованных камнях.