Вторичные иммунодефициты. Классификация. Механизмы развития. Методы иммунной диагностики. Принципы лечения.

Вторичные или приобретенные ИДС, понятие, классификация. Роль факторов окружающей среды в возникновении вторичных ИДС - клинико иммунолог синдромы возник в рез –те воздействия на имун систему различ поврежд факторов и хар выраж устойчивы снижением колич и функцион показателей специфич неспецифич факторов имунорезистентности Классиф 1. Иммунодепрессв сост вследствие инфекций —вирус бактер грибковые протозойные и гельминтозы сопров развитием временных иммунодефицитов, 2. Иммунодефициты, под влиянием иммунодепрессантов, —для преодоления несовместимости тканей при трансплантации, 3. Иммунодефициты вследствие потери белка, к ним приводят голодания, авитаминозы, заболевания почек страдает В-система иммунитета 4. Иммунодефициты вследствие нервного истощения страдают оба звена иммунитета — в крови появляются дефектные лимфоциты, на которых отсутствуют те или иные рецепторы, 5. Особый вид иммунодепрессивного состояния развивается при воздействии на организм ионизирующего излучения. Электромагнитные волны и поля СВЧ фазнае колебания фагоцитарн активности нейтрофилов и наруш синтеза антител. Шум 60-90 дб угнетен бактериц и комлементарной активности сыворотки крови , ионизир сниж пролиферацию костного мозга увелич проницаемочти Кижи легочного барьеров. Отличительные особенности вторичного иммунодефицитного состояния: 1-нарушения в сис-ме иммунитета действительно вторичны и появляются на фоне ранее нормального состояния орг-ма как в клиническом, так и в иммуно-лаборатоном отношении 2-нарушения в иммунной системе должны носить выраженный и устойчивый хар-р, поскольку известно, что показатели иммунной системы лабильны, различные ее звенья взаимодополняют и отчасти компенсируют друг друга. 3-нарушения в иммунной системе должны носить не только количественный, но и функ-ный хар-р 4-нарушения в системе иммунитета могут затрагивать показатели как специфического(адаптивного) иммунитета, так и неспецифической резистентности.

50. ВИЧ-инфекция. Синдром приобретенного иммунодефицита. Механизмы гибели Т-­хелперов при СПИДе, клинические проявления.

СПИД – инфицир ретровирус кот передаются при половом контакте, контакте с кров, ее продук или др жидкост орг-ма; во время родов,с молоком После первич зараж проник в Т-хелперы (СД4+), Т-лимфоц, моноциты, кост мозг — источ дендр клеток. Лимфоид сист явл главным местом обоснован и распр ВИЧ-инфекц. Вначале структура лимф узла сохран, но, потом в рез-те полного разруш, роль лимф узла в задерж вирус сниж.1 диссемин вируса.При начал инфицир -острым ВИЧ-синдром» происх диссем вируса в лимфоид органи др по всему орг-му, что сопров спец иммун ответом на ВИЧ-инфекцию, и вирус задерж в лимф ткани. Клин латен стад.кол Т-хелперов сниж в лимф органах продолж актив вирус репликация Прогрессир ВИЧ-з\б.После некот времени часто годы Т-хелперов опуск ниже критич ур (200 клеток в микролитре), и больные станов беззащит перед оппортунист з\б. У ВИЧ-инфицир широкий спектр иммун наруш -дефекты в кол и качестве лимфоцитов, моноцитов, макрофагов и функц естеств клеток-киллеров (NK), а также развитие аутоимун феномена. Гуморал ответ вкл образ антител, связ ВИЧ и нейтрализ его активность, а также антител, участв в формир антителозавис клет цитотоксичности (АЗКЦ). Клет иммун ответ вкл воспроизвед ВИЧ-специф хелпер + киллер + Т-лимфоцит, а также естест клеток-киллеров моннуклеаров, опосред АЗКЦ.

51.Принципы лабораторной диагностики первичных и вторичных ИДС.

Строение основного комплекса гистосовместимости человека, функции его локусов. Антигены НLA 1 и II классов и их роль в межклеточных взаимодействиях. Наследование антигенов гистосовместимости.

Строение основного комплекса гистосовместимости человека, функции локусов. Антигены гистосовместимости и кодир их гены образ систему гистосовместимости антигены гистосовместимости это слож белки гликопротеиды кот содержат на пов-ти всех ядросод клеток организма. Концентрация антигенов гистосовмест максим на лейкоцитах. Гены HLA комплекса на коротном плече 6 хромосомы размер 2 санти- Моргана и вкл 6 локусов от цетромеры : dp dq dr b c a. В составе HLA 3 класса генов кот обознач римскими цифроми. b c a антигены 1 класса, а ост 2 класса , также есть гены контролир синтез некот компонентов комплемента С2 С4а С4в – гены 3 класса в каждый локус входит множество аллельных вариантов генов – специф, аллели этих локусов обознач араб цифрами HLA комплекс центр системой генетич контроля иммун ответа управ всеми формами имун ответа. Гены HLA I класса подразделяются на локусы А,В,С, детерминирующие синтез трансплантационных антигенов. К HLA-генам относятся гены локусов DP DQ DR. HLA-антигены II и III класса в большей мере представлены на В-лимфоцитах, макрофагах, дендритных клетках и клетках Лангерганса, а также активированных Т-лимфоцитах, мпециализированных эпителиоцитах и др. 2 класс играет очень существенную роль в презентации антигенов и индукции иммунного ответа, при этом чужеродный антиген, кот-й презентируется с молекулами HLA II класса, распознается только субпопуляцией Т-хелперов.

Антигены I и II классов и их роль в межкл взаимод. Наследование антигенов гистосов.Гены 1 класса подразд на локусы АВС детерминир синтез трансплантационных антигенов они сод на всех ядросод клетках и играют роль в распознав своего т.к Т-киллеры распознают антиген детерминанты только в комплексе сHLA антиген 1 класса.Это полипептиды 2 нековал связ полипептид цепей 1 тяжел кодир генами системыHLA2 легкой кодир кодир единствен локусом 15 пары хромос. К HLA генам 2 класа относ гены локусовdp dq dr эти антигены в большей мере представлен на В лифоцитах макрофагах, дендрит клетках на активир Т лимфоц, кроме роли межклет взаимод иммунокмпетент клеток антигены 2 класса играют роль в презентации антигенов и индукции имун ответа чужерод антиген кот презентир молекулами 2 класа распознается только субпопуляцие Т хелперов они сост из 2 нековол связ трамембр гликопротеид

Определение HLA-генотипа, гаплотипа и фенотипа. Методы типирования антигенов HLA-системы (серологические, клеточно-опосредованные), практические аспекты типирования HLA- антигенов.

Определение HLA-генотипа, гаплотипа и фенотипау каждого чел-ка имеется диплоид набор хром 1 отцовская др материнская, Полный набор генов в материнской и отцовской хромосомах – генотип. Набор генов 1 хромосомы – гаплотип , его фенотип согласно принципу кодаминантности запис идентично А2, 3 В5,8. что имеется в генотипе то выражено в фенотипе Лимфоцитотоксич тест для опред HLA I и II клас. суспензию лимфоцитов смешивают и инкубируют анти-НЬА-антисывороток.Если ан­тисыворотка содержит антитела к одному из HLA-антигенов, то они свя­зываются с клеточной мембраной. Затем добавляют комплемент Клетки, несущие на мембране связанные антитела, будут разрушены при активации комплемента. Затем добавляют кот поглощается только мертвыми клетками, которые окрашиваются. Это позволяет установить HLA-антиген по антисыворотке, вызвавшей лизис. При этой пробе выявляются только серологически дефинированные (SD) HLA-антигены, которые представляют не весь спектр антигенов гис-тосовместимости, а только те из них, которые продуцируют антитела.Для идентификации антигенов гистосовместимости II класса, кодируе­мых генами HLA-DR, применяют клеточную реакцию (реакцию бласттрансформации). При этой пробе взвесь лимфоцитов смешива­ют с лимфоцитами донора. При отсутствии совместимости лимфоциты ре­ципиента подвергаются пролиферации и образуют бластные формы. Анти­гены II класса главного комплекса гистосовместимости активируют и сти­мулируют пролиферацию Т-хелперов, способных выявлять разницу в анти­генах, что недоступно при проведении серологических тестов.

54.Методы типирования антигенов НLA-­системы

55. Основы трансплантационного иммунитета. Роль клеточных и гуморальных механизмов в отторжении трансплантанта. Подбор донора и реципиента по антигенам гистосовместимости.

Подбор донора и реципиента по антигенам гистосовместимости Подбор донора.Подобрать донора, полностью совместимого с реципиентом по антигенам HLA, очень сложно, поскольку число комбинаций, составленных более чем из 100 антигенов этого семейства, чрезвычайно велико. Оценка совместимости донора и реципиента по антигенам HLA. Для оценки совместимости реципиента с предполагаемым донором определяют антигены HLA реципиента, исключают сенсибилизацию реципиента антигенами HLA, проводят пробу на индивидуальную совместимость. Помимо этого подбирают донора, совпадающего с реципиентом по антигенам системы AB0. Это особенно важно при трансплантации почки. Серологические методы Основной серологический метод типирования антигенов HLA — лимфоцитотоксический тест. Метод заключается в следующем: 1) к сывороткам против разных антигенов HLA добавляют по 2000 исследуемых лимфоцитов; 2) после инкубации добавляют комплемент (его источником может служить кроличья сыворотка); 3) лимфоциты, несущие антиген, против которого направлена сыворотка, под действием комплемента разрушаются; 4) затем к лимфоцитам добавляют краситель, который окрашивает только живые клетки. Результат оценивают по относительному числу погибших лимфоцитов. Резко положительный результат свидетельствует о том, что лимфоциты несут исследуемый антиген. Молекулярно-генетические методы.Эти методы основаны на исследовании ДНК. Генетическое типирование стало возможным после расшифровки нуклеотидной последовательности генов HLA и выявления различий между разными аллелями этих генов. ПЦР — метод, предназначенный для получения большого количества копий фрагментов ДНК с определенной нуклеотидной последовательностью. Основное достоинство метода — высокая чувствительность, он позволяет создать множество копий фрагмента ДНК при минимальном исходном ее количестве. Для проведения ПЦР необходимо синтезировать два олигонуклеотида, комплементарных 5'-концевым участкам цепей исследуемого фрагмента ДНК. Реакция включает следующие стадии: 1) денатурация ДНК с получением двух однонитевых фрагментов; 2) гибридизация олигонуклеотидов с 5'-концевыми участками этих фрагментов; 3) синтез комплементарной последовательности нуклеотидов. Полученные копии исследуют с помощью набора олигонуклеотидных зондов. Гибридизация зонда, который кодирует последовательность известного аллеля гена HLA, с исследуемым фрагментом ДНК свидетельствует о том, что в геноме исследуемого содержится данный аллель. Если гибридизации не происходит, данный аллель отсутствует. Отсутствие гибридизации со всеми олигонуклеотидными зондами не служит доказательством открытия нового аллеля, поскольку может быть обусловлен неполнотой использованного набора зондов. Разрабатывается молекулярно-генетическое типирование генов HLA класса I

56. Реакция «трансплантат против хозяина», меры профилактики. Условия, определяющие успешную трансплантацию в клинике.

В 1944 году Медовар установил, что повторная пересадка транс­плантата кожи от того же донора приводит к ускоренному его отторжению. На атом основании было сделано предположение, что в основе процесса отторжения лежат иммунологические механизмы, которые связаны с несовместимостью АГ донора и реципиента. Отторжение трансплантата тканей происходит в результате того, что иммунная система реципиента | распознает чужеродные тканевые АГ гистосовместимости на клетках | трансплантата и реагирует на них. Поэтому существует так называемый трансплантационный барьер, который обусловлен генетическим различием между донором и реципиентом. В трансплантологии различают 4 вида трансплантата:

1. аутотрансплантанты - это собственные ткани донора перенесен­ные из одного участка организма в другой. Не будучи чужеродным он не отторгается.

2 изотрансплантаты - это трансплантаты генетически идентичных индивид умов (однояйцовые близнецы, инбредные линии животных (родст­венные браки)).

3. аллотрансплонтаты - наиболее часто используются в медицин-
ской практике, это орган или ткань пересаживаемая генетически отличному
от донора реципиенту, относящиеся к одному виду. Трансплоктаты
распознаются как чужеродные.

4. ксенотрансплонтаты - это пересадки между органами различных видов. Трансплантат отторгается, но если его обработать иммунодепрессантами, то такие реакции используются а пересадка сосудов, сердеч-
ных клапанов и др.

66Трансплантационная иммунология. Роль клеточных и гуморальных механизмов в отторжении трансплантата.

При отторж-ии трансплантата набл гумор-ый и кл-ый иммун ответ. Трансплантаты м-т отторг-ся в 1-ые сутки в сверхостром отторжении (за мин и час) роль игр р-ции немедл гиперчувств. Предсуществующие АТ к АГ трансплантата провоцируют цитотоксич и иммунокомплексную р-цию против АГ. Это ведёт к васкулиту и ишемическому некрозу трансплантата. При остр отторжении предсуществующих АТ нет, но ИГ появл-ся после сенсибил-ии и направлены против паренхиматозных клеток трансплантата, обусловливая их некроз. Начавшись, процесс заканч-ся за неск-ко дней. Если отторжение происх-ит в сроки от неск недель до неск мес - то важн роль при таком подостром и хрон отторжении играют р-ции клет иммунитета. Решающее д-ие оказ Т-лимфоциты. Они сенсибилиз-ся в месте приживления трансплантата при участии АПК самого донора; оттуда по лимфат-им и кровеносн путям- в лимфоузлы, где из них обр клон эффекторн клеток, они проникают в кровоток, направл-ся к трансплантату и оказ поврежд. действие. При отторжении активны CD4 клетки. В хрон отторжении трансплантата роль играют ИГ. В р-ции отторжения прин участие специфич АТ к АГ транспл-та. Эти АТ обл-ют цитотокс активн-ю и вызыв антителозависимую клеточ цитотокс-ть (АЗКЦ). После пяти-шестидневного латентн периода вокруг трансплантата возн воспалит-ые процессы, кот и выз-ют его отторжение на 7-12 день после первичн пересадки (отторж по первичн типу). Если реципиенту повторно пересадить трансплантат -отторжение быстрее - по вторичн. типу. При первичн отторж разл 3 фазы гистол-их изм-ий: 1) приживл трансплантата к 5 дню. 2) начиная с 8-го дня, достиг-ся полная васкуляризация трансплантата. 3) с 11 дня восп-ие усиливается: увел-ся клеточная инфильтрация и разрастание мелких сосудов, усиливается некроз.

При отторж по первичн типу уч-ют в осн-ом мононуклеары и немного полиморфнояд-ых гранулоцитов, по вторичн типу - мононуклеары, и полиморфнояд-ые гранулоциты

Условия, определяющие успешную трансплантацию в клинике.Материальным субстратом несовместимости считают внутривидовые различия тканевых или гистолейкоцитарных антигенов (антигенов системы НLА). Таким образом, важнейшим в определении судьбы трансплантата фактором является подбор совместимой по НLА пары донор — реципиент. При пересадке трупного материала подбор совместимого по антигену НLА-А и В донора улучшает выживаемость трансплантата на 10—15 %. При этом большее значение имеет совместимость по НLА-В локусу, чем по НLА-А локусу. Подбор по НLА-С локусу несуществен для трансплантации. Показано, что НLА-011-совместимость увеличивает одногодичную выживаемость трансплантата на 15—20 % по сравнению с несовместимостью по двум ОЯ-антигенам. Наилучший эффект трансплантации наблюдается при отсутствии несовместимости по НLА-А, -В, -ОЯ или только по НLА-В и -ЭЯ. Иммунологическое обеспечение реципиента и донора подразумевает выполнение обязательных иммунологических исследований. 1. Тканевое типирование при аллогенной трансплантации как донора, так и реципиента, включающее серологическое типирование и постановку смешанной культуры лимфоцитов (для определения антигенов II класса).

2. Исследование иммунного статуса проводят как у донора, так и у реципиента. Обязательным для донора является контроль на носительство вируса СПИД или антител к нему, выявление антител к цитомегаловирусу и вирусу Эпстайна—Барра.

57. Противоопухолевый иммунитет. Современные методы иммунодиагностики и иммунотерапии опухолей.

Современные методы диагностики и иммунотерапии опухолей. Походы к иммунодиагностике злокачественных новообразований основаны на наличии на пов-ти опухолевых клеток специфических антигенов, отличающих их от нормальных клеток. Использование в иммунодиагностике высокоспецифичных меченых (изотопами, ферментами ИФА) моноклональных антител. С пом. Моноклональных антител удалось доказать, что по своим мембр. Антигенам лейкозные клетки лейкозные клетки соот-ют опред. Стадии дифференцировки нормального гемопоэтического клеточного ряда. Для клеток острого В-лимфолейкоза характерно наличие стадиоспецифического антигена CD10. Для диагностики В-клеточных лимфом исп-ся моноклональные антитела CD20. Моноклональные антигены к моноклональным антителам используются при радиоизотопном сканировании. С пом. Этого метода можно обнаружить самые незначительные колиства опухолевых клеток. При лейкозах это дает возможность оставшиеся после химиотерапии или облучения опухолевые клетки в костном мозге и на переферии. Методы определения в сыворотке крови раково-эмбриональных антигенов, в первую очередь альфа фетопротеина и карциноэмбрионального антигена. С пом. Антидиотипических моноклональных антител можно также идентифицировать опухолеспецифические цитотоксические Т-лимфоциты-как инфильтрирующие опухоль так и находящиеся в циркуляции. Современные методы терапии опухолей. Обязательным этапом любого иммунного ответа явл-ся пролиферация соот-щих клонов Т- и В-лимфоцитов, лимфоидная ткань явл-ся наиболее активно пролиферирующей. Поэтому всякое воздействие на орг-м, кот-е любым способом тормозит пролиферацию клеток, с необходимостью вызывает иммунодепрессию. После лучевой и химиотерапии опухолей у больных всегда формируется вторичный иммунодефицит В большей мере страдает Т-система иммунитета, играющая главную роль в защите орг-ма от опухолей. С этой целью обязательным звеном в комплексном лечении рака должно быть применение иммуностимуляции: исп-ся препараты гормонов тимуса(тимозин, тималин, Т-активин, тимоген, имунофан и др.), стимуляторы фагоцитарного звена иммунитета, рекомбинантные цитокины(ИЛ-2, ИЛ-12) и интерфероны (IFN-a/3,y). В лечении опухолей также применяются антицитокиновые препараты, новые препараты на основе моноклональных антител к различным поверхностным структурам опухолевых клеток: ритуксимаб, трастузумаб. Кроме неспецифической иммуностимуляции, делаются многие попытки создания специфических методов иммунотерапии рака. В первую очередь такими мишенями явл-ся опухолеспецифические антигены и антигены, ассоциированные с опухолями. При воздействии разными способами на эти мишени можно добиться уничтожения раковых клеток, не затрагивая или минимально повреждая нормальные. Способы иммунотерапии рака подразделяются на специфические и неспецифические, кот-е в свою очередь делятся на активные и пассивные. Одним из первых способов иммунотерапии рака был метод неспецифической адьювантной стимуляции, при кот-й введение в организм больного неспецифических стимуляторов, таких как БЦЖ, бактериальные смеси, синтетические полинуклеатиды вызывают стимуляцию фагоцитарной системы или поликлональную стимуляцию лимфоцитов. Эта стимуляция сопровождается повышением синтеза и секреции целого ряда лимфоцитов, моноцитов, разл. БАВ, а также пролиферацией лимфоцитов, в т.ч. и опухолеспецифических клонов.

58. Клеточные механизмы противоопухолевого иммунитета, роль Т-клеток, макрофагов, натуральных киллеров и К-клеток.