Орієнтовна основа дії при виконанні практичної роботи. 1. Визначити бактерицидні властивості шкіри.

1. Визначити бактерицидні властивості шкіри.

1) Обробити шкіру передпліччя ватяним тампоном, змоченим 1 млрд. суспензією добової культури E.coli. Звернути увагу на те, що ділянка шкіри, яку обробляють суспензією живих бактерій не повинна мати подряпин чи інших ушкоджень .

2) Через 5, 15 і 45 хв. зробити відбитки на пластинці із середовищем Ендо.

3) Пластинки помістити в чашки Петрі і інкубувати протягом 18-24 год.

4) Підрахувати кількість колоній, що виросли.

5) Зробити висновок про бактерицидність шкіри, користуючись таблицею.

2. Визначити титр лізоциму в слині.

1) Приготувати у ряду пробірок розведення слини - похідне-1:25 і далі дворазові до 1:3200.

2) Додати суспензію тест-культури M.lysodecticus і помістити пробірки у термостат.

3) Врахувати результати дослідження, занести їх до протоколу (титром вважається останнє розведення, яке викликало повний лізис тест-мікроба).

3. Визначити комплементарну активність сироватки крові за 100% гемолізом. Сироватку розвести фізіологічним розчином за схемою, додати гемолітичну систему (еритроцити барана + гемолітична сироватка). Результати записати до протоколу. (Титр комплементу - мінімальна кількість сироватки, що викликає гемоліз 0,5 мл гемолітичної системи. У нормі в сироватці міститься 0,04-0,006 комплементу за титром). При виконанні роботи слід уникати безпосереднього контакту із кров‘ю та її складниками.

4. Визначити фагоцитарну активність.

1) Розглянути мазок крові, інкубований із суспензією E.coli.

2) Підрахувати не менш 25 нейтрофілів і кількість бактерій, фагоцитованих цими клітинами.

3) Визначити фагоцитарний показник - % фагоцитуючих нейтрофілів (у нормі >/ 50%).

4) Визначити фагоцитарне число - середня кількість фагоцитованих бактерій на 1 нейтрофіл.

5) Розрахувати ПОФР за формулою: ПОФР = 3а + 2в+ 1с + 0d, де

а – кількість нейтрофілів, що містять понад 41 бактерію;

в – кількість нейтрофілів в, що містять 21-40 бактерій;

c – кількість нейтрофілів, що містять 1-20 бактерій;

d – кількість нейтрофілів, що не містять бактерій.

ПОФР = 10-24 реакція слабопозитивна;

ПОФР = 25-49 реакція ясно виражена;

ПОФР = 50-75 реакція різко позитивна.

Зробити висновок про стан фагоцитарної активності.

Після ознайомлення з теоретичними питаннями і ходом проведення експерименту вам пропонуєтьсявиконати наступні навчальнізавдання:

1.У лабораторію з метою оцінки стану неспецифічної резистентності організму хворого К., що страждає на рецидивуючу стафілококову інфекцію, була поставлена серологічна реакція з його сироваткою для визначення вмісту комплементу. Яку серологічну реакцію потрібно використовувати для цього? Який механізм цієї реакції?

2.З гнійних виділень уретри хворого лікар приготував мазок і пофарбував його за Грамом. При мікроскопії в препараті виявлена маса лейкоцитів, у цито-плазмі яких знаходилася велика кількість Гр- бобоподібних диплококів. Результати якого явища спостерігаються в препараті? Як буде називатися цей процес, якщо в ньому не здійснюється перетравлювання фагоцитованого мікроба?

3.Захворювання ока в хворого супроводжується зменшенням виділення слізної рідини. Які ускладнення може викликати цей симптом? Яке провести дослід-ження, щоб підтвердити передбачуване ускладнення і простежити за ходом лікування?

4.На лікуванні знаходиться група дітей, що прибули з Чорнобиля. Яким мето-дом без застосування ін'єкцій можна багаторазово досліджувати реактивність організму?

Додаток 1

Граф логічної структури теми: