VII. ВЫВОДЫ

1. Фрагменты тилакоидных мембран хлоропластов, обогащенных фотосистемой 2, выделенные из листьев гороха, обладали хорошей фотохимической активностью и по своему белковому составу соответствовали препаратам фотосистемы 2, описанным ранее в научной литературе.

2. Выбранные нами методы и подходы позволили выделить изолированные фракции белков PsbPи PsbQс сохранением их КП-активности.

3.Выявлено, что изолированный и очищенный от металлов белок PsbP не обладал карбоангидразоподобной активностью. Эта активность проявлялась только в присутствии ионов двухвалентных металлов, таких как Mn²⁺, Ca²⁺, Mg²⁺, Cu²⁺. Ионы Zn²⁺не вызывали увеличения КП-активности.

4. Белок РsbQобладал КП-активностью без добавления ионов двухвалентных металлов. Однако, его активность значительно возрастала в присутствии ионов Zn²⁺, Ca²⁺ и Mn²⁺.Было выяснено, что ионы Zn²⁺и Ca²⁺ по-разному воздействуют на карбоангидразоподобную активность белка PsbQ.

VIII. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Antal T. K., Venediktov P. S., Konev Yu. N., Matorin D. N., Hapter R., and Rubin A. B. (1998) Assessment of Vertical Profiles of Phytoplankton Photosynthetic Activity by the Fluorescence Method

Arnon D.I. (1949) Copper Enzymes in Isolated Chloroplasts.Polyphenoloxidase in Beta vulgaris.Plant Physiology 24, 1-15.

Arun K. Shanker (2008) Trace elements: Nutritional benefits, environmental contamination and health; 21 Modeofaction and toxicity of trace elements,Edited by M.N.V. Prasad

Barber J. (2002)P680: what is it and where is it?, Bioelectrochemistry. Jan;55(1-2):135-8.

Barber J., Chapman D.J. and Telfer A. (1987) Characterization of a PSII reaction center isolated from the chloroplasts of Pisum sativum. FEBS Lett. v.220, p.67-73.

Basics G. H. Krause E. Weis (1991) Сhlorophyll fluorescence and photosynthesis

Bradford M. M. (1976) A Rapid and Sensitive Method for the Quantitation of Microgram Quantities of Protein Utilizing the Principle of Protein-Dye Binding

Dai X., Yu Y., Zhang R., Yu X., He P. and Xu C. (2001) Relationship among Photosystem II carbonic anhydrase, extrinsic polypeptides and manganese cluster. Chinese Science Bulletin46, 406-408.

Guskov A., Kern J., Gabdulkhakov A., Broser M., Zouni A., Saenger W. (2009) Cyanobacterial photosystem II at 2.9 A resolution: role of quinones, lipids, channels and chloride. Nat. Struct. Mol. Biol. 16, 334–342.

Kang D., Gho Y.S., Suh M. and Kang C. (2002) Highly Sensitive and Fast Protein Detection with Coomassie Brilliant Blue in Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis.Bulletin of the Korean Chemical Society23, 1511-1512.

Khristin M.S., Ignatova L.K., Rudenko N.N., Ivanov B.N. and Klimov V.V. (2004) Photosystem II associated carbonic anhydrase activity in higher plants is situated in core complex. FEBS Letters577, 305-308.

Klimov V.V., Allakhverdiev S.I., Shuvalov V.A. and Krasnovsky A.A. (1982) Effect of extraction and re-addition of manganese on light reactions of photosystem-II preparations.FEBS Letters148, 307-312.

Laemmli U.K. (1970) Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4.Nature227, 680-685.

Lu Y.K. and Stemler A.J. (2007) Differing responses of the two forms of photosystem II carbonic anhydrase to chloride, cations, and pH.Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics 1767, 633-638.

Lu Y.K., Theg S.M. and Stemler A.J. (2005) Carbonic anhydrase activity of the photosystem II OEC33 protein from pea.Plant and Cell Physiology 46, 1944-1953.

McConnell I.L., Badger M.R., Wydrzynski T. and Hillier W. (2007) A quantitative assessment of the carbonic anhydrase activity in photosystem II.Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics 1767, 639-647.

Moroney J.V., Ma Y., Frey W.D., Fusilier K.A., Pham T.T., Simms T.A., DiMario R.J., Yang J.and Mukherjee B. (2011) The carbonic anhydrase isoforms of Chlamydomonas reinhardtii: intracellular location, expression, and physiological roles. Photosynthesis Research109, 133-149.

Moskvin O.V., Razguljayeva A.Y., Shutova T.V., Khristin M.S., Ivanov B.N. and Klimov V.V. (1999) Carbonic anhydrase activity of different Photosystem II preparations. In: Garab G. (ed.) Photosynthesis: Mechanism and Effects, Vol. 2, pp. 1201-1204. Kluver Academic Publishers, Dordrecht.

Renger G. (1992) Energy transfer and trapping in photosystem II. -In: Topics in photosynthesis, the photosystems: structure, functions and molecular biology. (ed.: Barber J.), Elsevier, Amsterdam, 45-99.

Muh F., Glockner C., Hellmich J., Zouni A., (2012) Light-induced quinone reduction in photosystem II. Biochimica et Biophysica Acta 1817, 44–65.

Rudenko N.N., Ignatova L.K. and Ivanov B.N. (2007) Multiple sources of carbonic anhydrase activity in pea thylakoids: soluble and membrane-bound forms. Photosynthesis Research 91, 81-89.

Shutova T., Nikitina J., Deikus G., Andersson B., Klimov V. and Samuelsson G. (2005) Structural dynamics of the manganese-stabilizing protein–effect of pH, calcium, and manganese. Biochemistry44, 15182-15192.

Stemler A. (1986) Carbonic anhydrase associated with thylakoids and Photosystem II particles from maize. Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Bioenergetics850, 97-107.

Villarejo A., Shutova T., Moskvin O., Forssen M., Klimov V.V. and Samuelsson G. (2002) A photosystem II-associated carbonic anhydrase regulates the efficiency of photosynthetic oxygen evolution. EMBO Journal21, 1930-1938.

Wilbur K.M. and Anderson N.G. (1948) Electrometric and colorimetric determination of carbonic anhydrase.The Journal of Biological Chemistry176, 147-154.

Гольцев В.Н., Каладжи М.Х., Кузманова М.А., Аллахвердиев С.И.(2014). Переменная и замедленная флуоресценция хлорофилла a - теоретические основы и практическое приложение в исследовании растений . Ижеск-Москва: Институт компьютерных исследований.

Казимирко Ю. В. Разработка флуорометрических методов оценки состояния фотосинтетического аппарата для биоиндикации среды: диссертация ... кандидата биологических наук : 03.00.02, 03.00.16. - Москва, 2006. - 117 с.

Ланкин А.В., Креславский В.Д., Худякова А.Ю., Жармухамедов С.К., Аллахвердиев С.И. (2014) Влияние нафталина на фотохимическую активность фотосистемы 2

Лукаткин А. С., Ревин В. В., Башмаков Д. И., Кренделева Т. Е., Антал Т. К., Рубин А. Б. (2009), Экологическая оценка состояния древесных растений г. Cаранска по флуоресценции хлорофилла

Малиновский В. И. (2004) Физиология растений, Владивосток: ДВГУ

Остерман, Л. (1981). Методы исследования белков и нуклеиновых кислот: электрофорез и ультрацентрифугирование. Москва: Наука.

Полевой В. В. (1989) Физиология растений, Москва: Высшая школа

Холл Д., Рао К. (1983) Фотосинтез, Москва: Мир

Шитов, А. В. Исследование карбоангидразной активности фотосистемы 2 гороха:диссертация ... кандидата биологических наук:03. 01. 04- Пущино, 2013. - 116 с.

Якушкина И. И. (2004). Физиология растений, Москва: Владос

Яныкин, Д. В. Фотопоглощение молекулярного кислорода на донорной стороне фотосистемы 2 в субхлоропластных мембранных препаратах с разрушенным водоокисляющим комплексом: диссертация ... кандидата биологических наук:03. 01. 04- Пущино, 2013. - 133с.

Электронные источники:

http://molbiol.edu.ru/protocol/08_04.html