Биуретовая реакция

Химизм реакции. Реакция открывает наличие в белке пептидной связи:

Метод основан на том, что белки (полипептиды) реагируют в щелочной среде с сернокислой медью, в результате реакции образуются комплексные соединения меди с пептидной группировкой, окрашенные в красно−фиолетовый или сине−фиолетовый цвет в зависимости от количества пептидных связей в молекуле белка.

Первоначально пептидные группы полипептида в щелочной среде претерпевают енолизацию:

………..

Енольная форма полипептида взаимодействует с гидроксидом меди (П) и образует окрашенный в сине−фиолетовый цвет комплекс:

Методика работы: к 5 каплям водного раствора белка прибавляют 3 капли 10% раствора NаОН и перемешивают, затем добавляют 1 каплю 1% раствора СuSO₄. В результате реакции развивается сине−фиолетовое окрашивание, свидетельствующее о наличии пептидных связей в белке.

Оборудование: 1) штатив с пробирками; 2) пипетки; 3) спиртовки.

Реактивы: 1) 1% раствор яичного белка; 2) 10% раствор NаОН; 3) 1% раствор CuSO₄.