КАТЕГОРИИ:
АстрономияБиологияГеографияДругие языкиДругоеИнформатикаИсторияКультураЛитератураЛогикаМатематикаМедицинаМеханикаОбразованиеОхрана трудаПедагогикаПолитикаПравоПсихологияРиторикаСоциологияСпортСтроительствоТехнологияФизикаФилософияФинансыХимияЧерчениеЭкологияЭкономикаЭлектроника
|
Нингидриновая реакция
Химизм реакции. Реакция основана на взаимодействии аминогрупп свободных аминокислот и аминных групп белковой молекулы с нингидрином. При нагревании (до 60−70 °C) a–аминокислоты окисляются нингидрином и подвергаются окислительному дезаминированию, с образованием NH3 и декарбоксилированию с образованием альдегида и СО2. Нингидрин при этом восстанавливается:
Восстановленная форма нингидрина реагирует с избытком нингидрина и аммиаком с образованием продуктов лилового цвета:
Пролин и оксипролин, содержащие аминогруппу, образуют в этой реакции продукт желтого цвета.
Методика работы: к 5 каплям раствора белка приливают 5 капель 0,1% водного раствора нингидрина, кипятят 1−2 минуты. В результате реакции появляется розово−фиолетовое или сине−фиолетовое окрашивание. Аналогичную реакцию можно провести с отдельной аминокислотой.
Оборудование: 1) штатив с пробирками; 2) пипетки; 3) спиртовки. Реактивы: 1) 1% раствор белка; 2) 0,1% водный раствор нингидрина.
|