Биуретовая реакции на полипептиды

Химизм реакции. См. раздел «Химия белка»

Методика работы: 0,5 мл гидролизата нейтрализуют по лакмусу едким натром, затем добавляют еще 0,5 мл этого реактива и 2–3 капли сернокислой меди. Развивается розовая или фиолетовая окраска.

Оборудование: 1) пипетки; 2) стеклянные палочки; 3) штатив с пробирками 4) лакмус; 5) спиртовки; 6) пробиркодержатели.

Реактивы: 1) едкий натр, 10% раствор; 2) сернокислая медь, 1% раствор.

Обнаружение пуриновых оснований (серебряная проба)

Химизм реакции. Реакция протекает по следующему уравнению:

гуанин

Методика работы: 10 капель гидролизата нейтрализуют по лакмусу до щелочной реакции 1-2 каплями концентрированного аммиака и добавляют 5 капель 1%-ного раствора азотнокислого серебра. При стоянии через 3-5 мин. выпадает бурый осадок серебряных производных пуриновых оснований.

Качественная реакция на пентозу (реакция Молиша)

Химизм реакции При взаимодействии концентрированной серной кислоты с гексозами или пентозами происходит дегидратация их: из пентоз образуется фурфурол,а из гексоз – оксиметилфурфурол, которые дают с тимолом продукт конденсации красного цвета:

продукт конденсации красного цвета

Методика работы: к 10 каплям гидролизата добавляют 2–3 капли 1% раствора тимола, перемешивают и по стенке пробирки осторожно приливают 20 капель концентрированной серной кислоты.

При встряхивании на дне пробирки образуется красное окрашивание вследствие образования продукта конденсации фурфурола с тимолом.

Оборудование: 1) стеклянные палочки; 2) штатив с пробирками.

Реактивы: 1) серная кислота, концентрированная; 6) тимол, 1% спиртовый раствор.

Обнаружение фосфорной кислоты (молибденовая проба)

Химизм реакции. Молибденовая проба на фосфорную кислоту:

Методика работы: к 10 каплям гидролизата приливают 20 капель молибденового реактива и кипятят. При этом жидкость окрашивается в лимонно-желтый цвет (не осадок). Пробирку сразу охлаждают в струе холодной воды. На дне пробирке появляется кристаллический лимонно-желтый осадок фосфорномолибденовокислого аммония.

Оборудование: 1) пипетки; 2) стеклянные палочки; 3) штатив с пробирками; 4) водяная баня.

Реактивы: 1) молибденовый реактив в азотной кислоте (7,5 г молибденовокислого аммония растворяют в 100 мл дистиллированной воды и добавляют 100 мл 32% раствора азотной кислоты – уд. вес 1,2).