Ксантопротеиновая реакция на циклические аминокислоты

Химизм реакции. Реакция открывает наличие в белках циклических аминокислот, имеющих в своем составе бензольное кольцо (Фен, Тир, Три)

При взаимодействии белков с концентрированной азотной кислотой при высокой температуре происходит реакция, обусловленная нитрованием бензольного кольца с образованием нитросоединений желтого цвета:

Фенилаланин Динитрофенилаланин

Методика работы: к 5 каплям раствора белка добавляют 3 капли концентрированной азотной кислоты, осторожно кипятят. Вначале появляется осадок денатурированного белка (под влиянием кислоты), который при нагревании окрашивается в желтый цвет вследствие образования нитросоединений.

Оборудование: 1) штатив с пробирками; 2) пипетки; 3) спиртовки.

Реактивы:1) 1% раствор белка; 2) концентрированная азотная кислота.

Реакция Фоля

Химизм реакции. Реакция основана на том, что при кипячении белка со щелочью аминокислоты цистин или цистеин легко отщепляют серу в виде сернистого натрия, который с плюмбитом дает осадок сернистого свинца черного или бурого цвета:

1. CH₂SH CH₂OH

| |

CHNH₂ + 2 NaOH ® CHNH₂ + Na₂S + H₂O

| |

COOH COOH

2. Na₂S + (CH₃COOH)₂Pb ® 2CH₃COONa + PbS¯

Методика работы: к 5 каплям раствора белка прибавляют 5 капель реактива Фоля, кипятят, через 2−3 минуты появляется бурый или черный осадок сернистого свинца.

Оборудование: 1) штатив с пробирками; 2) пипетки; 3) спиртовки.

Реактивы: 1) 1% раствор белка; 2) реактив Фоля (к 5−10 % раствору уксуснокислого свинца добавляют 10% раствор едкого натра до растворения образовавшегося осадка).